bv2細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的一道也是主要的一道免疫防線。中風(fēng)引起的腦損傷會激活小膠質(zhì)細(xì)胞，使小膠質(zhì)細(xì)胞極化為M1型和M2型。M1小膠質(zhì)細(xì)胞可以產(chǎn)生高水平的促炎細(xì)胞因子，加劇急性腦損傷，而M2型表現(xiàn)出對大腦具有神經(jīng)保護(hù)作用，改善中風(fēng)后的癥狀。然而，M2小膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)神經(jīng)保護(hù)的潛在機(jī)制仍不清楚。有文獻(xiàn)表明，間充質(zhì)干細(xì)胞來源的外泌體有利于缺血性卒中后神經(jīng)元的重塑和功能恢復(fù)，還有小膠質(zhì)細(xì)胞來源的微囊泡有調(diào)節(jié)神經(jīng)元興奮性的報道等。

　　bv2細(xì)胞復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)步驟：

　　1.從零下80℃冰箱或者液氮罐中取出冷凍管，迅速投入37℃水浴中，使其融化（1分鐘左右）。

　　2.培養(yǎng)基緩慢稀釋至原體積的10倍以上。

　　3.1低速離心10分鐘，吸去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基培養(yǎng)剛復(fù)蘇的細(xì)胞。

　　3.2六個小時細(xì)胞*貼壁后吸去含有凍存液的培養(yǎng)基并換成*培養(yǎng)基。

　　bv2細(xì)胞傳代實(shí)驗(yàn)步驟：

　　1.取密度80%左右的Hela細(xì)胞，吸去舊的培養(yǎng)基，用PBS或者Trypsin消化液潤洗細(xì)胞以減少殘留的血清對Trypsin的抑制作用。

　　2.吸去PBS或者Trypsin，加入Trypsin消化液，于37℃消化2~4分鐘，于倒置顯微鏡下觀察，當(dāng)細(xì)胞之間出現(xiàn)間時或者變圓時，吸掉Trypsin 消化液。（也可以直接加入適量含血清的新鮮培養(yǎng)基終止Trypsin的消化作用并進(jìn)行吹打分離細(xì)胞，消化細(xì)胞時應(yīng)靜置以避免漂浮的細(xì)胞滾動成團(tuán)）

　　3.加入適量新鮮培養(yǎng)基，用移液器上下吹打數(shù)次打散細(xì)胞團(tuán)塊以盡可能形成單細(xì)胞懸液，吹打均勻后，按照稀釋比例轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充*培養(yǎng)基并以正常培養(yǎng)條件培養(yǎng)。